Бета набор агониста ELISA на свинина 96 Wells/набор цыпленка теста сыворотки мочи яйца молока

Бета набор агониста ELISA на свинина 96 Wells/набор цыпленка сыворотки мочи яйца молока

 

1. Принцип

Β-агонисты испытывают набор основаны на конкурсном immunoassay энзима для обнаружения β-агонистов в образце. Соединяя антиген пре-покрыт на микро--хорошо нашивках. Β-агонисты в образце и соединяя антигенах пре-покрытых на микро--хорошо нашивках состязаются для антител анти--β-агонистов. После того как добавление конъюгата энзима, субстрат TMB добавлено для колорита. Значение оптически плотности (OD) образца имеет отрицательную корреляцию с β-агонистами в образце. Это значение сравнено к стандартной кривой и выпарки β-агонистов затем получены.

 

2. Технические данные

Чувствительность: 0,1 ppb
Температура инкубации: 25℃
Время инкубации: 30min~15min

Предел обнаружения:
Porcine моча 0.3ppb
Свинина 0.6ppb

Тариф перекрестной реакции: Clenbuterol 100%, Cimaterol <4>

Скорость восстановления:
Porcine моча, свинина 90%±30%

 

3. Компоненты

 

1	Микро--хорошо прокладки	12 прокладки с 8 съемным колодцы по каждому
2	стандартное решение 6× (1 mL каждое)	0ppb	0.1ppb
		0.3ppb	0.9ppb
		2.7ppb	8.1ppb
3	Конъюгат энзима	7ml	красная крышка
4	Рабочий раствор антитела	10ml	голубая крышка
5	Субстрат a	7ml	белая крышка
6	SubstrateB	7ml	черная крышка
7	Остановите решение	7ml	желтая крышка
8	20× сконцентрировало моя буфер	40ml	белая крышка
9	образец 5× извлекая решение	50ml	прозрачная крышка

 

4. Не обеспечиваемые материалы требуемые но

1) Оборудования: читатель microplate, принтер, гомогенизатор, вортекс, генератор, центрифуга, инкубатор, измеряя капает из пипетки, баланс (чувствительность взаимная 0,01 g)
2) Micropipettors: одноканальные 20-200µL, 100-1000µL, и мульти-канал 30-300µL;
3) реагенты: NaOH, HCI.

 

5. Пре-обработка образца

Инструкции (следующие пункты необходимо общаться с перед пре-обработкой)
1) только устранимые подсказки можно использовать для экспериментов и подсказки необходимо изменить при использовании для поглощения различных реагентов;
2) перед экспериментом, каждая экспириментально утварь должна быть чиста и должна бытьочищена при необходимости, во избежание загрязнение которое мешает с экспириментально результатами.

Подготовка решения перед пре-обработкой образца:
1) 0.2M HCI: растворите 17.2mL HCI в деионизированной воде к 1L.
2) NaOH 1M: растворите NaOH 4g в деионизированной воде до 100 mL.
3) образец извлекая решение: образец 1 части 5X извлекая решение + 4 части деионизировал воду, смешивание равномерно.

5,1 Porcine моча
Примите 20 µL ясная моча, сразу обнаружьте его (если моча грязна, то фильтровать или центрифуга на 4000 r/min на минута 10, после этого примите ясную мочу). Магазин на замороженной окружающей среде если не используйте.
Створка разбавления образца: 1

5,2 свинина
1. весьте 2±0.05g гомогенизировал образец ткани в трубку центрифуги 50ml, добавьте HCl 3ml 0.2M, встряхивание на 3 MIN.
2. После этого добавьте решение NaOH 600ul 1M и образец 2.4ml извлекая решение, встряхивание для 3min, центрифугу на 4000 r/min на комнатной температуре (℃ 20-25) на 10 MIN.
3. примите жидкость вверх-слоя 20µL для анализа. (Примечание: если жирный слой после центрифуги, то извлеките жирный слой или отдельный жирный слой, принимает ясную жидкость для анализа)
Створка разбавления образца: 4

 

6. Процедуры по ELISA

6.1Instructions
1. принесите все реагенты и микро--хорошо прокладки к комнатной температуре (℃ 20-25) перед использованием;
2. возвращение все реагенты в ℃ 2-8 немедленно после пользы;
3. Воспроизводимость анализа ELISA, в значительной степени, зависит от последовательности стирки плиты. Правильная деятельность мыть плиты узловой пункт в ELISA процедуры;
4. Для инкубации на температурах постоянного, все образцы и реагенты должны избежать светлой выдержки, и каждое microplate должно быть загерметизировано мембраной крышки.

процедуры 6.2Operation
1. принесите набор теста к комнатной температуре (℃ 20-25) на по крайней мере минута 30, заметьте что каждый реагент необходимо трясти равномерно перед использованием;
2. положите необходимые микро--хорошо прокладки в рамки плиты. Заново герметизировал неиспользованное не замерзаемые microplate, который хранят на ℃ 2-8.
3. разбавьте сконцентрированный 20X буфер стирки 40ml на 1:19 с деионизированной водой (буфером 1 части сконцентрированным 20X моя + 19 вода деионизированная частями). Или подготовьте как нужное количество.
4. оцифровка: номер микро-колодцы согласно образцам и стандартному решению; каждые образец и стандартное решение должны быть выполнены в дубликате; запишите их положения.
5. добавьте 20µL образца или стандартного решения в отдельные двойные колодцы, тогда добавьте конъюгат энзима, 50ul/well; после этого добавьте рабочий раствор антитела, 80µL/well. Смешайте нежно путем трясти плиту вручную, уплотнение microplate с мембраной крышки, инкубируйте на ℃ 25 на 30 MIN.
6. полейте жидкостное из microwell, добавьте 250µL/well буфера стирки, помойте для 4-5 раз, 15-30s каждый раз, тогда примите вне и хлопните для того чтобы высушить с бумагой вещество-поглотителя (если пузыри после хлопать, то отрежьте их с чистыми подсказками).
7. колорит: добавьте 50µL субстрата a, тогда добавьте 50µL субстрат b в каждый колодец. Смешайте нежно путем трясти плиту вручную, и инкубируйте на ℃ 25 для minin 15 темное для колорита.
8. определение: добавьте 50µL остановите решение в каждый колодец. Смешайте нежно путем трясти плиту вручную. Установите длину волны читателя microplate на 450nm для того чтобы определить значение OD каждого колодца. (Порекомендуйте прочитать значение OD на двойн-длине волны 450/630nm не позднее минута 5).

 

7. Суждение результата

2 метода для того чтобы судить результаты; первое одно грубое суждение, пока второе количественное определение. Примечание что значение OD образца имеет отрицательную корреляцию с концентрацией β-агонистов в образце.

7,1 качественное определение
Ряд концентрации (ng/mL) получил от сравнивать среднее значение OD образца с этим из стандартного решения. Высказывать предположение о том, что значение OD образцаⅠ 0,3, и это из Ⅱ образца 1,0, значение OD стандартных решений является следующим: 2,243 для 0ppb, 1,816 для 0.1ppb, 1,415 для 0.3ppb, 0,74 для 0.9ppb, 0,313 для 2.7ppb, 0,155 для 8.1ppb, соответственно ряд концентрации Ⅰ образца 2,7 к 8.1ppb, и это из Ⅱ образца 0,3 к 0.9ppb.

7,2 количественное определение
Средние значения значений absorbance полученных для среднего значения OD (b) образца и стандартного решения разделенного значением OD (B0) первого стандартного решения (0 стандартов) и затем умноженного к 100%, это

 

Процент значения absorbance =	B	×100%
	B0

 

Значение OD среднего B-the (двойных колодцев) образца или стандартного решения
Значение OD среднего B0-the 0 решений ng/mL стандартных
Нарисуйте стандартную кривую с процентами абсорбции стандартных решений и значениями semilogarithm решений β-агонистов стандартных (ng/mL) как Y- и X-ось, соответственно. Прочитайте соответствуя концентрацию образца от стандартной кривой путем включать свой процент абсорбции в стандартную кривую. Приводя значение затем умножено створкой разбавления, в конце концов получая концентрацию β-агонистов в образце.

 

8. Меры предосторожности

комнатная температура 1.The под ℃ 25 или температура реагентов и образцов не возвращающ в комнатную температуру (℃ 20-25) приведут к более низкому стандартному значению OD.
2.Dryness microplate в моя процессе будет сопровожено ситуациями включая нелинейные стандартные кривые и нежелательную воспроизводимость; Так продолжайтесь к следующему шагу немедленно после стирки.
3.Mix равномерно, в противном случае там будет нежелательной воспроизводимостью.
4.The останавливают решение решение масляной серной кислоты 2 m, избегают контактировать с кожей.
5. Не используйте набор превышая свой срок годности. Польза разбавленных или фальсифицированных реагентов от наборов приведет к изменениям в чувствительности и обнаруживая значениях OD. Не обменяйте реагенты от наборов различных номеров серии для использования.
6. положите неиспользованное microplate в сумку автоматическ-запечатывания для того чтобы заново герметизировать ее. Стандартное вещество и бесцветный цвет бывшие светочувствительный, и таким образом они нельзя сразу подвергнуть действию света.
7. сбросьте решение колорита с любым цветом который показывает вырождение этого решения. Обнаруживая значение 0 стандартных решений (0 ppb) меньше чем 0,5 показывает свое вырождение.
8. Оптимальная температура реакции ℃ 25, и слишком высокие или слишком низкие температуры приведут в изменениях в обнаруживая чувствительности и значениях OD.

 

9. Хранение и срок годности

Хранение: магазин на не замерли ℃ 2-8, который.
Срок годности: 12 месяца; дата продукции на коробке.
Примечания: Если пакет вакуума плит microtiter имеет утечку, то плита microtiter нормальна и эффективный, не повлияйте на экспириментально результат. Пожалуйста чувствуйте, что свободно использовать.

 

 

 

 

 

Q1: Когда оно будет погружен?
A1: Мы грузим товары для вас как можно скорее не позднее 7 рабочих дней после получать оплату. (В случае внешних факторов как эпидемия, доставка может быть задержана)

 

Q2: Оно поддерживает OEM/ODM?
A2: Его можно поддержать, но специфическому количеству нужно быть больше чем 100 000 частей, которое удобно для подгонянных продуктов.

 

Q3: Как ваша фабрика делает по отоношению к проверке качества?
A3: Мы национально аттестовали ISO9001 и ISO13485. Наш производственный процесс соответствует стандартным процедурам для обеспечения оптимального качества продукции.

 

Q4: Как обеспечить послепродажное обслуживание?
A4: Мы обеспечиваем профессиональное онлайн техническое послепродажное обслуживание. Мы можем обеспечить вас с индивидуальным наведением через видео, телефон, etc.

 

Q5: Что метод оплаты?
A5: Мы получаем оплату T/T.

 

Q6: Как грузить?
A6: Выберите самый лучший грузя метод для вас путем получать цитаты от наших много кооперативных несущих, и также корабля согласно вашим требованиям.