Набор теста продовольственной безопасности SEM ELISA нитрофурана для чувствительности 0.02ppb 96Wells/Kit молока

Набор теста продовольственной безопасности SEM ELISA нитрофурана для чувствительности 0.02ppb 96Wells/Kit молока

 

1. Принцип набора теста продовольственной безопасности SEM ELISA нитрофурана

 

Этот набор теста основан на конкурсном immunoassay энзима для обнаружения нитрофурана (SEM) в образце. Соединяя антигены пре-покрыты на микро--хорошо нашивках. Нитрофуран (SEM) в образце и соединяя антигены пре-покрытые на микро--хорошо нашивках состязаются для антител анти--SEM. После того как добавление конъюгата энзима, субстрат TMB добавлено для колорита. Значение оптически плотности (OD) образца имеет отрицательную корреляцию с SEM в нем. Это значение сравнено к стандартной кривой и концентрация SEM затем получена.

 

2. Технические данные

 

Чувствительность: 0.02ppb

Температура инкубации: 25℃

Время инкубации: 30min~15min

Ткань предела обнаружения, яйцо, мед: 0.1ppb

Тариф перекрестной реакции

SEM 100%

AMOZ < 0="">

AOZ < 0="">

AHD < 0="">

Скорость восстановления

Ткань 75±25%

Мед 70±20%

Яйцо 95±25%

 

3. Компоненты набора теста продовольственной безопасности SEM ELISA нитрофурана

 

1	Микро--хорошо прокладки	12 прокладки с 8 съемным колодцы по каждому
2	стандартное решение 6× (1 mL каждое)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Конъюгат энзима	7ml	красная крышка
4	Рабочий раствор антитела	7ml	голубая крышка
5	Субстрат a	7ml	белая крышка
6	SubstrateB	7ml	черная крышка
7	Остановите решение	7ml	желтая крышка
8	20× сконцентрировало моя буфер	40ml	белая крышка
9	2× сконцентрировало перерастворять решение	50ml	прозрачная крышка
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	10ml	черная крышка

 

4. Не обеспечиваемые материалы требуемые но

 

1) оборудования: читатель microplate, принтер, гомогенизатор, прибор азот-засыхания, вортекс, центрифуга, измеряя капает из пипетки, баланс (взаимная чувствительность 0,01 g), инкубатор, вода - ванна;

2) Micropipettors: одноканальные 20-200µL, 100-1000µL, и мульти-канал 30~300µl;

3) Реагенты: NaOH, этиловый эфир уксусной кислоты, н-гексан, HCI (приблизительные 36,5%), K2HPO4·3H2O.

 

5. Пре-обработка образца

 

Инструкции

Следующие пункты необходимо общаться с перед пре-обработкой сколько угодно вида образца:

1) Только устранимые подсказки можно использовать для экспериментов и подсказки необходимо изменить при использовании для поглощения различных реагентов;

2) Перед экспериментом, каждое экспириментально оборудование должно быть чисто и должно бытьочищено при необходимости, во избежание загрязнение которое мешает с экспириментально результатами.

Подготовка решения перед пре-обработкой образца:

1) 0,1 M K2HPO4: растворите g 11,4 K2HPO4·3H2O в деионизированной воде к 500mL.

2) HCl 1 m: растворите 8.6mL HCI (приблизительные 36,5%) в деионизированной воде к 100mL.

3) NaOH 1 m: растворите NaOH 4g в деионизированной воде к 100mL.

4) 2×concentrated перерастворяя решение разбавлено с деионизированной водой на 1:1 (1mL сконцентрировало перерастворять решение + деионизированную 1mL воду), используемом для перерастворять образца.

 

5,1 подготовка образцов

a) Ткань, яйцо

1) Весьте 1± 0.05g гомогенизированного образца, добавляйте 4mL дистиллированной воды, 0.5mL 1 m HCI и 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) к каждой трубке, трясут как следует для 2min;.

2) Инкубируйте ℃ at37 над ночью (часами approx16) или инкубируйте at56℃ водой - ванной (2 часами).

3) Добавьте 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH 0.4mL 1M и 6mL этиловый эфир уксусной кислоты к каждой трубке, встряхивание для 30s.

4) Центрифуга на вышеуказанном 4000r/min на комнатной температуре (℃ 20-25) для 10min (если эмульгация или слой этиловый эфир уксусной кислоты нет достаточно для 3ml, то не инкубируйте образец на 80℃ воде - ванна для 10min и центрифуги повторно; или увеличьте скорость и продлите время центрифуги).

5) Передача 3mL слоя этилового эфира уксусной кислоты в новую центробежную трубку и испариться к засохлости азотом или воздухом на 50℃.

6) Растворите сухие остатки в н-гексане 2mL, добавьте 1mL разбавленного перерастворяя решения, смешивание как следует на 30 секунд, центрифуга на над 4000 r/min на комнатной температуре (℃ 20-25) на минута 10; Извлеките участок н-гексана вверх-слоя (если эмульгация, после извлекать участок н-гексана вверх-слоя, то инкубируйте образец на воде 70℃ - ванна для 10-20min, центрифугует повторно).

7) Примите 50 µL низкой для анализа.

Створка разбавления образца: 2

b) Мед

1) Весьте 2± 0.05g гомогенизированного образца (меда), добавляйте 4mL дистиллированной воды, 0.5mL 1 m HCI и 100 µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) к каждой трубке, трясет как следует для 2min;.

2) Инкубируйте ℃ at37 над ночью (часами approx16) или инкубируйте at56℃ водой - ванной (2 часами).

3) Добавьте 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH 0.4mL 1M и 6mL этиловый эфир уксусной кислоты к каждой трубке, встряхивание для 30s.

4) Центрифуга на вышеуказанном 4000r/min на комнатной температуре (20-25℃) для 10min (если эмульгация или слой этиловый эфир уксусной кислоты нет достаточно для 3ml, то не инкубируйте образец на 80℃ воде - ванна для 10min и центрифуги повторно; или увеличьте скорость и продлите время центрифуги).

5) Передача 3mL слоя этилового эфира уксусной кислоты в новую центробежную трубку и испариться к засохлости азотом или воздухом на ℃ 50.

6) Растворите сухие остатки в н-гексане 2mL, добавьте 1mL разбавленного перерастворяя решения, смешивание как следует на 30 секунд, центрифуга на над 4000r/min на комнатной температуре (℃ 20-25) на минута 10; Извлеките участок н-гексана вверх-слоя (если эмульгация, после извлекать участок н-гексана вверх-слоя, то инкубируйте образец на воде 70℃ - ванна для 10-20min, центрифугует повторно).

7) Примите 50 µL низкой для анализа.

Створка разбавления образца: 1

 

6. Процедуры по ELISA

 

6,1 инструкции

1) Принесите все реагенты и микро--хорошо прокладки к комнатной температуре (℃ 20-25) перед использованием;

2) Возвратите все реагенты в ℃ 2-8 немедленно после пользы;

3) Воспроизводимость анализа ELISA, в значительной степени, зависит от последовательности стирки плиты. Правильная деятельность мыть плиты узловой пункт в ELISA процедуры;

4) Для инкубации на температурах постоянного, все образцы и реагенты должны избежать светлой выдержки, и каждое microplate должно быть загерметизировано мембраной крышки.

 

6,2 правила технической эксплуатации

1) Положите набор на комнатную температуру (20-25°C) на по крайней мере 30 минут, заметьте что каждый реагент необходимо трясти и смешать задолго до того пользы, и положите необходимые прокладки microwell в рамку плиты. Неиспользованные microplates следует быть заново герметизированы и сохранены на не замерли 2-8°C, который.

2) Подготовка решения: Взятие 40 mL 20× сконцентрировало моя буфер и разбавить его с деионизированной водой на 1:19 (1 часть 20× сконцентрировала моя буфер + 19 частей деионизированной воды). Или подготовьте как нужно.

3) Оцифровка: Пронумеруйте microwells согласно образцам и стандартным решениям; каждые образец и стандартное решение должны быть сделаны в дубликате, и их положения должны быть записаны.

4) Добавьте 50µL образца или стандартного решения для того чтобы дублировать колодцы; добавьте 50ul конъюгата энзима к каждому колодцу, после этого добавьте 50µL рабочего раствора антитела, и трясите плиту для того чтобы смешать нежно. Загерметизируйте microplate с фильмом крышки и инкубируйте на 25°C для 30min.

5) Полейте вне жидкость в microwells, Пэт сухое на бумаге вещество-поглотителя, добавьте 250 μL/well моя буфера для того чтобы помыть плиту microwell на 15-30s, тогда примите вне и Пэт сухое с бумагой вещество-поглотителя, повторение 4-5 раз. (Если воздушные пузыри после выстукивать, то отрезали их с чистой подсказкой).

6) Развитие цвета: Добавьте µL 50 µL субстрата a и 50 субстрата b к каждому колодцу. Трясите плиту вручную для того чтобы смешать нежно и инкубировать на 25°C на минута 15 в темноте для развития цвета.

7) Assay: Добавьте μL 50 решения стопа к каждому колодцу. Смешайте нежно путем трясти плиту вручную. Установите длину волны читателя microplate до 450 nm для того чтобы определить значение OD каждого колодца. (Порекомендованы, что читает значение OD на двойной длине волны 450/630nm не позднее 5 минут).

 

7. Суждение результата

 

2 метода для того чтобы судить результаты: первое одно грубое суждение, пока второе количественное определение. Примечание что значение OD образца имеет отрицательную корреляцию с содержанием SEM.

7,1 качественное определение

Ряд концентрации (ng/mL) можно получить от сравнивать среднее значение OD образца с этим из стандартного решения. Высказывать предположение о том, что значение OD образцаⅠ 0,3, и это из Ⅱ образца 1.0ppb, значение OD стандартных решений является следующим: 2,243 для 0ppb, 1,816 для 0.02ppb, 1,415 для 0.06ppb, 0,74 для 0.18ppb, 0,313 для 0.54ppb, 0,155 для 1.62ppb, соответственно ряд концентрации Ⅰ образца 0,54 к 1.62ppb, и это из Ⅱ образца 0,06 к 0.18ppb.

7,2 количественное определение

Средние значения значений absorbance получены для среднего значения OD (b) образца и стандартного решения разделенного значением OD (B0) первого стандартного решения (0 стандартов) и затем умноженного к 100%, т.е.,

Процент значения absorbance =	B	×100%
	B0

Значение OD среднего B-the (двойных колодцев) образца или стандартного решения

Значение OD среднего B0-the стандартного решения 0ng/mL

Нарисуйте стандартную кривую с процентами абсорбции стандартного решения и значениями semilogarithm решения SEM стандартного (ng/mL) как Y- и X-ось, соответственно. Прочитайте соответствуя концентрацию образца от стандартной кривой путем включать свой процент абсорбции в стандартную кривую. Приводя значение затем умножено соответствуя створкой разбавления, в конце концов получая концентрацию SEM в образце.

 

8. Меры предосторожности

 

1) Если комнатная температура ниже, то чем 25℃ или температура реагента и образец не возвращают в комнатную температуру (20-25℃), стандартное значение OD упадет.

2) Во время моя процесса, засыхание microplate будет сопровожено нелинейностью стандартной кривой, и воспроизводимость не идеальна; поэтому, продолжайте к следующему шагу немедленно после стирки.

3) Смешайте хорошо, в противном случае воспроизводимость будет плоха.

4) Остановите решение решение масляной серной кислоты 2 m, избегите контакта кожи.

5) Не используйте набор за сроком годности при хранении. Польза разбавленных или фальсифицированных реагентов от набора может привести в изменениях в значениях OD чувствительности и обнаружения. Не замените реагенты в различных сериях наборов.

6) Заново герметизируйте неиспользованные microplates в ziplock сумках. Стандартные решения и бесцветные муфты светочувствительный и не могут сразу подвергнуться действию для того чтобы осветить.

7) Сбросьте любой окрашивающий раствор цвет которого показывает что решение ухудшало. Значение обнаружения меньше чем 0,5 на стандартное решение 1 (0 ppb) показывает ухудшение.

8) Оптимальная температура реакции 25℃, и чувствительность обнаружения и значение OD изменят если температура слишком высока или слишком низка.

 

9. Хранение и срок годности

 

Хранение: Магазин на 2-8°C, не замерзает.
Срок годности: 12 месяца; дата продукции на коробке.
Примечание: Если утечки упаковки вакуума microplate, его можно все еще использовать без влияния результатов теста, поэтому, то вас смогите использовать его с уверенностью.

 

Q1: Когда оно будет погружен?
A1: Мы грузим товары для вас как можно скорее не позднее 7 рабочих дней после получать оплату. (В случае внешних факторов как эпидемия, доставка может быть задержана)

 

Q2: Оно поддерживает OEM/ODM?
A2: Его можно поддержать, но специфическому количеству нужно быть больше чем 100 000 частей, которое удобно для подгонянных продуктов.

 

Q3: Как ваша фабрика делает по отоношению к проверке качества?
A3: Мы национально аттестовали ISO9001 и ISO13485. Наш производственный процесс соответствует стандартным процедурам для обеспечения оптимального качества продукции.

 

Q4: Как обеспечить послепродажное обслуживание?
A4: Мы обеспечиваем профессиональное онлайн техническое послепродажное обслуживание. Мы можем обеспечить вас с индивидуальным наведением через видео, телефон, etc.

 

Q5: Что метод оплаты?
A5: Мы получаем оплату T/T.

 

Q6: Как грузить?
A6: Выберите самый лучший грузя метод для вас путем получать цитаты от наших много кооперативных несущих, и также корабля согласно вашим требованиям.