Набор теста продовольственной безопасности нитрофурана AMOZ ELISA быстрый для чувствительности 0.03ppb 96Wells/Kit молока

Набор теста продовольственной безопасности нитрофурана AMOZ ELISA для чувствительности 0.03ppb 96Wells/Kit молока

 

1. Принцип набора теста продовольственной безопасности нитрофурана AMOZ ELISA

 

Этот набор обнаружения основан на конкурсном immunoassay энзима для обнаружения AMOZ в образцах. Проспряганные антигены пре-покрыты на прокладках microwell. AMOZ в образце состязается с проспряганным антигеном пре-покрытым на прокладке microwell для анти--AMOZ антитела. После того как конъюгат энзима добавлен, субстрат TMB добавлен для пятнать. Значение оптически плотности (OD) образца отрицательно сопоставлено с AMOZ в нем. Это значение сравнено к стандартной кривой и концентрация AMOZ затем получена.

 

2. Технические данные

 

Чувствительность: 0.03ppb

Температура инкубации: 25℃

Время инкубации: 30min~15min

Ткань предела обнаружения, яйцо, мед: 0.1ppb

Тариф перекрестной реакции

AMOZ 100%

AHD < 0="">

AOZ < 0="">

SEM < 0="">

Скорость восстановления

± 25% ткани 80

± 25% меда 75

± 25% яйца 95

 

3. Компоненты набора теста продовольственной безопасности нитрофурана AMOZ ELISA

 

1	Микро--хорошо прокладки	12 прокладки с 8 съемным колодцы по каждому
2	стандартное решение 6× (1 mL каждое)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	Конъюгат энзима	7ml	красная крышка
4	Рабочий раствор антитела	7ml	голубая крышка
5	Субстрат a	7ml	белая крышка
6	SubstrateB	7ml	черная крышка
7	Остановите решение	7ml	желтая крышка
8	20× сконцентрировало моя буфер	40ml	белая крышка
9	2× сконцентрировало перерастворять решение	50ml	прозрачная крышка
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)

 

4. Не обеспечиваемые материалы требуемые но

 

1) Оборудование: читатель microplate, принтер, гомогенизатор, сушильщик азота, vortexer, центрифуга, измеряя трубка, баланс (взаимное 0.01g), инкубатор, вода - ванна;

2) Микропипетка: одиночный канал 20-200µL, 100-1000µL, мульти-канал 30-300µl;

3) Реагенты: NaOH, этиловый эфир уксусной кислоты, н-гексан, HCl (около 36,5%), K2HPO4 3H2O.

 

5. Пре-обработка образца

 

проинструктируйте

Следующим пунктам необходимо обратиться к перед любым видом pretreatment образца:

1) Эксперимент может только использовать устранимые подсказки, и подсказки необходимо заменить аспирируя различные реагенты;

2) Перед экспериментом, экспириментально оборудование необходимо очистить и re-очистить при необходимости для избежания загрязнения мешая с экспириментально результатами.

Подготовка решения перед pretreatment образца:

1) 0,1 M K2HPO4: Растворите g 11,4 K2HPO4·3H2O в деионизированной воде до 500 mL.

2) HCl 1 m: Растворите 8,6 mL HCl (около 36,5%) в деионизированной воде до 100 mL.

3) NaOH 1 m: Растворите 4 g из NaOH в деионизированной воде до 100 mL.

4) Разбавьте сконцентрированное 2× перерастворяющ решение с деионизированной водой на 1:1 (1 сконцентрированный mL перерастворяющ решение + 1 mL деионизировал воду) для перерастворять образца.

 

5,1 подготовка образцов

) ткань, яйцо

1) Весьте 1± 0.05g гомогенизированного образца, добавляйте 4mL дистиллированной воды, 0.5mL 1 m HCI и 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) к каждой трубке, трясут как следует для 2min;.

2) Инкубируйте at37℃ над ночью (часами approx16) или инкубируйте at56℃ водой - ванной (2 часами).

3) Добавьте 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH 0.4mL 1M и 6mL этиловый эфир уксусной кислоты к каждой трубке, встряхивание для 30s.

4) Центрифуга на вышеуказанном 4000r/min на комнатной температуре (℃ 20-25) для 10min (если эмульгация или слой этиловый эфир уксусной кислоты нет достаточно для 3ml, то не инкубируйте образец на воде 80 ℃ - ванне для 10min и центрифуги повторно; или увеличьте скорость и продлите время центрифуги).

5) Передача 3mL слоя этилового эфира уксусной кислоты в новую центробежную трубку и испариться к засохлости азотом или воздухом на 50℃.

6) Растворите сухие остатки в н-гексане 2mL, добавьте 1mL разбавленного перерастворяя решения, смешивание как следует на 30 секунд, центрифуга на над 4000 r/min на комнатной температуре (℃ 20-25) на минута 10; Извлеките участок н-гексана вверх-слоя (если эмульгация, после извлекать участок н-гексана вверх-слоя, то инкубируйте образец на воде 70 ℃ - ванна для 10-20min, центрифугует повторно).

7) Примите 50 µL низкой для анализа.

Створка разбавления образца: 2

b) Мед

1) Весьте 2± 0.05g гомогенизированного образца (меда), добавляйте 4mL дистиллированной воды, 0.5mL 1 m HCI и 100 µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) к каждой трубке, трясет как следует для 2min;.

2) Инкубируйте at37℃ над ночью (часами approx16) или инкубируйте at56℃ водой - ванной (2 часами).

3) Добавьте 5mL 0.1M K2HPO4, NaOH 0.4mL 1M и 6mL этиловый эфир уксусной кислоты к каждой трубке, встряхивание для 30s.

4) Центрифуга на вышеуказанном 4000r/min на комнатной температуре (20-25℃) для 10min (если эмульгация или слой этиловый эфир уксусной кислоты нет достаточно для 3ml, то не инкубируйте образец на воде 80 ℃ - ванне для 10min и центрифуги повторно; или увеличьте скорость и продлите время центрифуги).

5) Передача 3mL слоя этилового эфира уксусной кислоты в новую центробежную трубку и испариться к засохлости азотом или воздухом на ℃ 50.

6) Растворите сухие остатки в н-гексане 2mL, добавьте 1mL разбавленного перерастворяя решения, смешивание как следует на 30 секунд, центрифуга на над 4000r/min на комнатной температуре (℃ 20-25) на минута 10; Извлеките участок н-гексана вверх-слоя (если эмульгация, после извлекать участок н-гексана вверх-слоя, то инкубируйте образец на воде 70 ℃ - ванна для 10-20min, центрифугует повторно).

7) Примите 50 µL низкой для анализа.

Створка разбавления образца: 1

 

6. Процедуры по ELISA

 

6,1 инструкции

1) Принесите все реагенты и микро--хорошо прокладки к комнатной температуре (℃ 20-25) перед использованием;

2) Возвратите все реагенты в ℃ 2-8 немедленно после пользы;

3) Воспроизводимость анализа ELISA, в значительной степени, зависит от последовательности стирки плиты. Правильная деятельность мыть плиты узловой пункт в ELISA процедуры;

4) Для инкубации на температурах постоянного, все образцы и реагенты должны избежать светлой выдержки, и каждое microplate должно быть загерметизировано мембраной крышки.

6,2 правила технической эксплуатации

1) Принесите набор теста к комнатной температуре (℃ 20-25) на по крайней мере минута 30, заметьте что каждый реагент необходимо трясти для того чтобы смешать равномерно перед использованием, положите необходимые микро--хорошо прокладки в рамки плиты. Заново герметизировал неиспользованное microplate, магазин на не замерли ℃ 2-8, который.

2) Подготовка решения: разбавьте 40mL 20 буфера сконцентрированного × моя с деионизированной водой на 1:19 (буфере стирки 1 части 20 сконцентрированном × + 19 частей деионизированной воды). Или подготовьте как нужно.

3) Оцифровка: номер микро-колодцы согласно образцам и стандартному решению; каждые образец и стандартное решение должны быть выполнены в дубликате, показателе их положения.

4) Добавьте 50µL образца или стандартного решения в отдельные двойные колодцы; добавьте конъюгат после этого 50µL рабочего раствора антитела в каждый колодец, смешивание энзима 50ul нежно путем трясти плиту вручную. Загерметизируйте microplate с мембраной крышки, andincubate на 25 ℃ for30min.

5) Полейте жидкость из microwell, щитка для того чтобы высушить на бумаге вещество-поглотителя, добавьте 250 µL/well моя буфера для того чтобы помыть microplate на 15-30s, после этого примите вне и хлопните для того чтобы высушить с бумагой вещество-поглотителя, повторением 4-5 раз. (Если пузыри после хлопать, то отрезали их с чистыми подсказками).

6) Колорит: добавьте µL 50 µL субстрата a и после этого 50 субстрата b в каждый колодец. Смешайте нежно путем трясти плиту вручную, тогда инкубируйте на ℃ 25 на минута 15 на темноте для колорита.

7) Определение: добавьте 50µL остановите решение в каждый колодец. Смешайте нежно путем трясти плиту вручную. Установите длину волны читателя microplate на 450nm для того чтобы определить значение OD каждого колодца. (Порекомендуйте прочитать значение OD на двойн-длине волны 450/630nm не позднее 5 минут).

 

7. Суждение результата

 

2 метода для того чтобы судить результаты: первое одно грубое суждение, пока второе количественное определение. Примечание что значение OD образца имеет отрицательную корреляцию с концентрацией AMOZ.

7,1 качественное определение

Ряд концентрации (ng/mL) AMOZ можно получить от сравнивать среднее значение OD образца с этим из стандартного решения. Высказывать предположение о том, что значение OD образцаⅠ 0,3, и это из Ⅱ образца 1,0, значение OD стандартных решений является следующим: 2,243 для 0ppb, 1,816 для 0.03ppb, 1,415 для 0.09ppb, 0,74 для 0.27ppb, 0,313 для 0.81ppb, 0,155 для 2.43ppb, соответственно ряд концентрации Ⅰ образца 0,81 к 2.43ppb, и это из Ⅱ образца 0,09 к 0.27ppb.

7,2 количественное определение

Средние значения значений absorbance получены для среднего значения OD (b) образца и стандартного решения разделенного значением OD (B0) первого стандартного решения (0 стандартов) и затем умноженного к 100%, т.е.,

Процент значения absorbance =	B	×100%
	B0

Значение OD среднего B-the образца или стандартного решения

Значение OD среднего B0-the 0 решений ng/mL стандартных

Нарисуйте стандартную кривую с процентами абсорбции стандартного решения и значениями semilogarithm решения AMOZ стандартного (ng/mL) как Y- и X-ось, соответственно. Прочитайте соответствуя концентрацию образца от стандартной кривой путем включать свой процент абсорбции в стандартную кривую. Приводя значение затем умножено соответствуя створкой разбавления, в конце концов получая концентрацию AMOZ в образце.

 

8. Меры предосторожности

 

1) Если комнатная температура ниже, то чем 25℃ или температура реагента и образец не возвращают в комнатную температуру (20-25℃), стандартное значение OD упадет.

2) Во время моя процесса, засыхание microplate будет сопровожено нелинейностью стандартной кривой, и воспроизводимость не идеальна; поэтому, продолжайте к следующему шагу немедленно после стирки.

3) Смешайте хорошо, в противном случае воспроизводимость будет плоха.

4) Остановите решение решение масляной серной кислоты 2 m, избегите контакта кожи.

5) Не используйте набор за сроком годности при хранении. Польза разбавленных или фальсифицированных реагентов от набора может привести в изменениях в значениях OD чувствительности и обнаружения. Не замените реагенты в различных сериях наборов.

6) Заново герметизируйте неиспользованные microplates в ziplock сумках. Стандартные решения и бесцветные муфты светочувствительный и не могут сразу подвергнуться действию для того чтобы осветить.

7) Сбросьте любой окрашивающий раствор цвет которого показывает что решение ухудшало. Значение обнаружения меньше чем 0,5 на стандартное решение 1 (0 ppb) показывает ухудшение.

8) Оптимальная температура реакции 25℃, и чувствительность обнаружения и значение OD изменят если температура слишком высока или слишком низка.

 

9. Хранение и срок годности

 

Хранение: магазин на не замерли ℃ 2-8, который.

Срок годности: 12 месяца; дата продукции на коробке.

Примечание: Если пакет вакуума microplate имеет утечку, то он все еще действителен для использования, не влияет на результат теста, ослабить для использования.

 

 

Q1: Когда оно будет погружен?
A1: Мы грузим товары для вас как можно скорее не позднее 7 рабочих дней после получать оплату. (В случае внешних факторов как эпидемия, доставка может быть задержана)

 

Q2: Оно поддерживает OEM/ODM?
A2: Его можно поддержать, но специфическому количеству нужно быть больше чем 100 000 частей, которое удобно для подгонянных продуктов.

 

Q3: Как ваша фабрика делает по отоношению к проверке качества?
A3: Мы национально аттестовали ISO9001 и ISO13485. Наш производственный процесс соответствует стандартным процедурам для обеспечения оптимального качества продукции.

 

Q4: Как обеспечить послепродажное обслуживание?
A4: Мы обеспечиваем профессиональное онлайн техническое послепродажное обслуживание. Мы можем обеспечить вас с индивидуальным наведением через видео, телефон, etc.

 

Q5: Что метод оплаты?
A5: Мы получаем оплату T/T.

 

Q6: Как грузить?
A6: Выберите самый лучший грузя метод для вас путем получать цитаты от наших много кооперативных несущих, и также корабля согласно вашим требованиям.